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磷酸化修饰分析技术服务

  1.蛋白磷酸化修饰分析技术概述

  蛋白质磷酸化修饰是生物体内重要额共价修饰方式之一,它与信号转导、细胞周期生长发育以及癌症机理等诸多生物学问题密切相关。鉴定蛋白质磷酸化位点有助于阐明蛋白质磷酸化的机制与生物学功能。目前,质谱是进行蛋白质磷酸化分析最有利的方法之一。

  在蛋白质样品中,磷酸化蛋白质和磷酸化肽的含量非常低,并且存在各种非磷酸化肽和无机盐的干扰,使得磷酸化蛋白质和磷酸化肽的检测十分困难。因此,发展新型富集方法和材料对磷酸化蛋白质和磷酸化肽进行快速、准确分析具有十分重要的意义。

  常用的磷酸化肽富集方法有固定金属离子亲和色谱法(immobilized metal affinity chromatography,IMAC)、强阴阳离子交换色谱法、免疫法和金属氧化物富集法等。在众多的金属氧化物中,TiO2是最常用、发展最成熟的一种。在酸性条件下,TiO2表面带正电荷,可以与磷酸化肽产生静电作用而达到吸附的目的。富集后的产物有高精度质谱分析,并通过专业软件完成数据检索。

  2.蛋白磷酸化修饰分析技术优势

  TiO2富集效率高达95%,可提高修饰肽段检测效率

  基于高精度的质谱分析,对修饰位点精确鉴定

  3.服务流程,质量控制及周期

  实验部分包括:蛋白样品制备,蛋白酶解,TiO2富集,高分辨质谱,数据库检索及出具正式实验报告。总实验周期为3周。


  4.报告内容

  word版实验报告:包括实验原理,实验流程,实验试剂仪器,实验步骤及参数,实验结果。

  excel版定性定量差异分析数据:全部检测蛋白的登录号及名称,磷酸化修饰位点及可信度,分子量、等电点、肽段数等常规数据。

  RAW文件:质谱原始数据文件

  5.样品要求